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液相色譜柱的故障處理方法

更新時間:2016-12-09瀏覽:3533次

  氣泡溢出
 
  流動相內有氣泡,關閉泵,打開泄壓閥,打開purg鍵,清洗脫氣,氣泡不斷從過濾器冒出,進入流動相,無論打開purge鍵幾次,都無法清除不斷產生的氣泡。原因過濾器長期沉浸于乙酸銨等緩沖液內,過濾器內部由于霉菌的生長繁殖,形成菌團,阻塞了過濾器,緩沖液難以流暢地通過過濾器,空氣在泵的壓力作用下經過濾器進入流動相。處理過濾器浸泡于5%硝酸溶液中,超聲清洗幾分鐘即可;亦可將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中12~36小時,輕輕震蕩幾次,再將過濾器用純水清洗幾次,打開泄壓閥,打開purge鍵清洗脫氣,如仍有氣泡不斷從過濾器冒出,繼續將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中,如沒有氣泡不斷從過濾器中冒出,說明過濾器內部的霉菌菌團已被硝酸破壞,流動相可以流暢地通過過濾器。打開泄壓閥,打開泵,流速調1.0~3.0ml/min,純水沖洗過濾器1小時左右。即可將過濾器清洗干凈。關閉泄壓閥,純甲醇沖洗半小時即可。液相色譜柱的故障處理方法
 
  柱壓高
 
  ⑴緩沖液鹽分如(乙酸銨等)沉積于柱內;
 
  ⑵樣品污染沉積。處理對于*種情況先用40~50℃的純水,低速正向沖洗柱子,待柱壓逐漸下降后,相應提高流速沖洗,柱壓大幅度下降后,用常溫純水沖洗,之后用純甲醇沖洗柱子30分鐘;對于第二種情況,由樣品的沉積引起污染的C18柱,和純水反向沖洗柱子,換成甲醇沖洗,接著用甲醇+異丙醇(4+6)沖洗柱子,再用換成甲醇沖洗,然后用純水沖洗,后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上。
 
  無指示
 
  ⑴泵密封墊圈磨損;
 
  ⑵大量氣泡進入泵體。處理對于*種情況,更換密封墊圈;對于第二種情況,在泵作用的同時,用一個50ml的玻璃針筒在泵的出口處幫助抽出空氣。
 
  不穩定
 
  原因系統中有空氣或者單向閥的寶石球和閥座之間夾有異物,使得兩者不能密封。處理工作中注意觀察流動相的量,保證不銹鋼濾器沉入儲液器瓶底,避免吸入空氣,流動相要充分脫氣。如為單向閥和閥座之間夾有異物,拆下單向閥,放入盛有丙酮的燒杯用超聲波清洗。液相色譜柱的故障處理方法
 
  峰分叉
 
  ⑴色譜柱被污染;
 
  ⑵柱頭填料塌陷。處理對于*種情況,先用純水反向沖洗柱子,然后換成甲醇沖洗,接著用甲醇+異丙醇(4+6)沖洗柱子(沖洗時間的長短由樣品污染的情況而定),再換成甲醇沖洗,然后用純水沖洗,后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上。如沖洗后依然出峰不佳,則考慮第二種情況。對于第二種情況,擰開柱頭,檢查柱填料是否硬結或塌陷。去除硬結部分(污染的填料),裝入新填料,滴一滴甲醇,填料下陷,再填,用與柱內徑相同的頂端平滑的不銹鋼桿壓緊,再填平,滴甲醇,再壓緊反復幾次,直裝滿填平。柱頭用甲醇沖洗干凈,擦凈柱外壁的填料,擰緊柱頭,用純甲醇沖洗30分鐘以上。
 
  重復性差
 
  ⑴進樣閥漏液;
 
  ⑵加樣針不到位。
 
  ⑶液量不足.
 
  處理(li)對于(yu)(yu)*種情況更換(huan)進樣(yang)(yang)閥墊圈;對于(yu)(yu)第二(er)種情況保證(zheng)加樣(yang)(yang)針插到底,注射樣(yang)(yang)品(pin)溶(rong)液(ye)后須(xu)快速(su)、平穩地從LOAD狀態轉(zhuan)換(huan)到INJECT狀態,以保證(zheng)進樣(yang)(yang)量(liang)的(de)(de)準確。日常(chang)工作中(zhong),液(ye)相色(se)(se)譜(pu)(pu)(pu)儀的(de)(de)保養非常(chang)重要(yao)(yao)(yao),如要(yao)(yao)(yao)注意不(bu)要(yao)(yao)(yao)讓空氣進入(ru)輸液(ye)系(xi)統和高壓泵中(zhong),儲液(ye)器內(nei)的(de)(de)溶(rong)液(ye)如長時間未用(yong)(yong)應(ying)清(qing)洗(xi)(xi)儲液(ye)器并更換(huan)溶(rong)液(ye),每次用(yong)(yong)完(wan)色(se)(se)譜(pu)(pu)(pu)儀后緩(huan)沖液(ye)要(yao)(yao)(yao)用(yong)(yong)純水沖洗(xi)(xi)干凈,防(fang)止(zhi)無(wu)機鹽析出或沉積;樣(yang)(yang)品(pin)的(de)(de)前處理(li)也很重要(yao)(yao)(yao),任何樣(yang)(yang)品(pin)都要(yao)(yao)(yao)盡(jin)(jin)可能地去除雜(za)質,*溶(rong)解,盡(jin)(jin)量(liang)減(jian)少(shao)對色(se)(se)譜(pu)(pu)(pu)柱(zhu)(zhu)的(de)(de)污染,以延長色(se)(se)譜(pu)(pu)(pu)柱(zhu)(zhu)的(de)(de)使(shi)用(yong)(yong)壽命,同時避免注射過濃的(de)(de)樣(yang)(yang)品(pin)溶(rong)液(ye),以免殘留液(ye)在進樣(yang)(yang)閥內(nei)析出固(gu)體(ti)引起堵塞;色(se)(se)譜(pu)(pu)(pu)柱(zhu)(zhu)作好(hao)標記(ji),用(yong)(yong)于(yu)(yu)不(bu)同分(fen)析目的(de)(de)的(de)(de)色(se)(se)譜(pu)(pu)(pu)柱(zhu)(zhu)不(bu)要(yao)(yao)(yao)混用(yong)(yong)等。

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